高完整度 EVs 純化設備！輕鬆、快速且溫和的純化方法！
高完整度 EVs 純化設備！輕鬆、快速且溫和的純化方法！
胞外體 (EVs) 廣泛存在於大多數體液中，並攜帶可反映疾病特異性及即時生理狀態的訊息因子，已有許多研究證實，EVs 作為生物標記的可行性。在精準醫學中，EVs 在低侵入性的液態切片（liquid biopsy）中的應用廣泛受到關注，特別是在癌症診斷和監測方面，因此基於 EVs 的液態切片檢測技術在癌症診斷和監控方面展現出潛在臨床效益［5］。
在純化方面，超高速離心 (Ultracentrifugation) 雖廣泛用於血液樣品分離，卻因產量低 (因超高轉速導致壓碎和變形)、重複性差且耗時；沈澱法 (Precipitation) 在純化過程中所產生的聚合物雜質在後續分析結果中較不被接受；免疫親和法 (Immune Affinity) 具高純度優勢，但其結果極大地依賴所用抗體的敏感性和特異性，考慮到 EVs 的異質性以及不同批次之間差異，結果可能不一致，很顯然，EVs 純化方法在臨床上仍面臨挑戰［2, 3］。
為了因應高效且穩定的 EVs 純化技術，圖爾思生技儀器部代理 LabSpinner - ExoDiscovery (盤式微量胞外體純化儀)，此設備利用 TFF (Tangential Fluid Flow) 和 低轉速離心 (<500g) 並搭配具專利的流體輔助分離技術 (Fluid-Assisted Separation Technology)，來實現快速、簡單且品質穩定的臨床檢體 EVs 純化。
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一、ExoDisc 提供高完整度的 EVs 純化效果［1］
二、高產量及高濃度 (Plasma samples)
應用：監測活體小鼠腫瘤移植模型中的腫瘤生長
傳統的血液的 EVs 純化與分析方法需要大量的血液樣品，且必須犧牲小鼠。相較之下，ExoDisc 的 EVs 產量非常高，因此可以每週從同一隻小鼠身上重複獲取少量 100µL 的血液，實現腫瘤移植小鼠模型研究［2］。
每週採血追蹤結果顯示，隨著接種的攝護腺癌細胞生長 (腫瘤體積增加)，攝護腺腫瘤標記物如 PSMA、EGFR 和 HSP90 也隨之增加［2］。
● 結論
ExoDisc 和 ExoDiscovery 是創新的 EVs 純化設備，提供了一種相當簡單、快速且高效的EVs 純化方法。ExoDisc 能夠從小至 30µL 的全血樣品中實現完整的 EVs 純化，並在低離心力下保持大尺寸 EVs 的完整性，顯示出更高的純度與產量，且具有良好的重複性。使用此設備，從全血樣品中濃縮 EVs 的整個過程可在 30 至 50 分鐘內完成。通過 LabChip 電泳、RT-qPCR 等分析，ExoDisc 分離的 EVs 在 RNA 含量、結構完整性及表面標記物（如CD9、CD63、CD81）等方面表現卓越，並有效降低血液污染物如 Albumin 的含量。此外，ExoDisc 支持從少量血液樣本收集 EVs，適用於小鼠腫瘤模型的連續監測，展現出顯著的臨床應用潛力，有助於實現癌症的早期診斷和追蹤。
Reference
- Woo, H.-K., Sunkara, V. et al. Exodisc for Rapid, Size-Selective, and Efficient Isolation and Analysis of Nanoscale Extracellular Vesicles from Biological Samples. ACS Nano 11, 1360–1370 (2017). https://doi.org/10.1021/acsnano.6b06131
- Sunkara, V., Kim, C.J. et al. Fully Automated, Label-Free Isolation of Extracellular Vesicles from Whole Blood for Cancer Diagnosis and Monitoring. Theranostics 9, 1851-1863 (2019). https://doi.org/10.7150/thno.32438
- Dong, L., Zieren, R. C., Horie, K. et al. Comprehensive Evaluation of Methods for Small Extracellular Vesicles Separation from Human Plasma, Urine and Cell Culture Medium. J Extracell Vesicles (2020). https://doi.org/10.1002/jev2.12044
- Leung, J. et al. Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles Through Orthogonal Approaches for the Development of Intraocular EV Therapy. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 65, (2024). https://doi.org/10.1167/iovs.65.3.6
- 外泌體檢測技術在癌症診斷之應用與法規考量 161 期。財團法人醫藥品查驗中心 Copyright © Center for Drug Evaluation, All Rights Reserved. (2024). >>查看更多
