蛋白質轉譯後修飾分析
在不同的生理條件下,蛋白質除了表現量的變化外,轉譯後修飾(PTM)通常也發揮關鍵作用。傳統的鑑定方法主要依賴能夠辨認修飾位點的抗體,然而,由於抗體專一性的限制,以及許多修飾位點缺乏相對應的抗體產品,這種方法存在一些限制。相較之下,利用質譜分析的策略能夠全面分析蛋白質所有可能的修飾位點,並直接鑑定,相對於抗體的間接鑑定法,提供了更高的可靠性。我們圖爾思技術服務中心提供最專業的蛋白質轉譯後修飾(PTM)分析服務,從樣品製備、上機到分析,讓您能夠安心地將樣品交給我們處理。
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服務內容
以磷酸化(phosphorylation)位點鑑定為例,圖爾思利用蛋白酶將樣本中的蛋白質水解成小片段的胜肽段(peptide)後,經過TiO2管柱時會因為親和性使得帶有磷酸化修飾的胜肽較容易進到質譜進行分析,再利用資料庫比對將有可能接上磷酸的胺基酸設定為有可能具有磷酸化,再進一步行比對和驗證(如下圖)。
項目包含:
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服務名稱 | 服務說明 |
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蛋白質 磷酸化位點分析(Phos-site) | 利用蛋白酶將樣本中的蛋白質水解成胜肽(peptide)後,經過TiO2管柱時,會因為親和性使得帶有磷酸化修飾的胜肽較容易進到質譜進行分析,再比對資料庫中將有可能接上磷酸的胺基酸設定為有可能具有磷酸化的條件後,加以進行驗證。 |
蛋白質 醣化位點分析(N-linked Glyco-site) | 利用蛋白酶將樣本的N-linked的醣基進行移除,經過LC-MS/MS可以比對醣基連接的位置,再圖譜分析中可對醣基位點進行驗證 |
蛋白質 泛素化位點分析(Ub-site) | 透過LC-MS/MS進行泛素化(Ubiquitin)位點分析 |
蛋白質轉譯後修飾位點分析(PTM-site) | 蛋白質修飾位點(PTM)是蛋白因其與功能基團或蛋白質的共價連接,以及其肽鍵的斷裂而經歷的化學變化。這些修飾改變了單個蛋白質的結構,因此有可能影響其活性、穩定性、定位和相互作用的分子,可透過此服務看到更多感興趣的位點 |
蛋白質轉譯後修飾位點 客製化分析(Customization) | 因應客戶protein PTM site的需求,提供客製化的蛋白質服務 |
服務流程
是否有QC、PTM-peptide enrichment步驟視PTM而定