外泌體濃縮新選擇—逆向超濾濃縮,勢不可擋!
EVs(Extracellular Vesicles),是由細胞所分泌的雙層脂質囊泡,內含核酸、蛋白質、醣類、脂質等多重訊號因子,不同細胞來源的EVs胞內因子可反應其來源細胞的特異性,能作為疾病檢測、治療的新型生物標誌(biomarker)。EVs直徑大小介於40-1000nm之間,可區分成Exosomes(40-150 nm)、Microvescles (150-200nm)與大於200nm以上的Oncosomes等。
EVs依照不同的來源,如serum、plasma與CCM(Cell Culture Medium),都需要進行濃縮與分離才能進行後續的biomarker分析等應用。
目前EVs的濃縮主要以超過濾(ultrafiltration, UF)為主,利用濾膜孔徑(pore size)來篩選不同大小的分子。超濾膜的孔徑小於100nm以下,一般不會以孔徑尺寸區分,而是以被分離物質的分子量(Dalton; Da),來表示所需保留(截留)的分子大小,又稱截留分子量(Molecular Weight Cut-Off, MWCO)。
濾膜分子量的選擇,建議選擇目標分子分子量1/3至1/6的 MWCO,即低於目標分子量的3~6倍,且分離的分子之間,大小至少應相差10倍以上,以確保混合物有效分離;如果以分子直徑選擇濾膜,選用濾膜孔徑小於目標分子直徑即可。外泌體(40-150nm)建議可選用100kDa MWCO UF進行濃縮。
圖爾思2023年最強的代理新品牌,HansaBioMed,推出了2.5mL的100kDa EV-spinner Ultrafiltration濃縮管,採用了獨家的逆向超濾膜設計(Reverse ultrafiltration)(圖一),利用反向離心的作用力,讓樣本有更高的回收率。低蛋白結合膜,Polyethersulfone的使用,更進一步減少EVs回收損失。低速離心,2500G的轉速,以較溫和方式濃縮,不會破壞EVs構型,減少表面biomarker的遺失風險。與常見的V型濃縮管相比,逆向超濾設計更不容易堵塞濾膜,至少可重複使用5次以上。
圖一、100 kDa EV-spinner
圖二、sgRNA簡單快速的反向超濾濃縮,讓您快速取得能濃縮樣本
圖三、EV-spinner濃縮回收率可達8成以上,相較於傳統V型MWCO濃縮管有更高回收率
圖四、EV-spinne反向超濾濃縮更不容易堵塞,重複使用不會影響濃縮效率。
產品特色:
1. 逆向超濾膜設計(Reverse ultrafiltration),提高回收率與降低膜阻塞
2. 低速離心,不易破壞EVs構型,減少表面biomarker遺失
3. 低蛋白結合膜(PES),減少蛋白殘留,提高回收率
4. 小體積濃縮,最少樣本只要0.050mL,最多可達2.5 ml
HansaBioMed EV-spinner逆相超濾濃縮管,是你小量外泌體濃縮的最佳選擇!
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