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2019．04
如何分離單細胞(single cell)
上一篇已經和大家分享單細胞(single cell)研究對於細胞生物學與醫學發展的重要性，科學家對於單細胞分離技術(single cell isolation)的要求自然也會越來越高，因此今天會為大家介紹幾種主要的單細胞分離技術：
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- 微吸管法(Aspirator tube assembly)：這是一種非常傳統的單細胞分離技術(single cell isolation)，這種方法主要原理是利用口徑非常微小的吸管在顯微鏡下直接吸取細胞型態較好的細胞進行後續的研究，這種方法的好處是對細胞幾乎不會造成損傷，因此分離出來的單細胞不管是進行下游功能性研究或是進行定序都能得到較好的實驗數據，但因為是靠技術人員全手工操作，因此對於技術人員的品質要求非常高，當然，為了解決這個問題，後續也有開發出利用微吸管原理的自動化機器，只是這種機器的成本非常的高，不一定符合一般實驗室的成本效益。
- 雷射顯微切割法(Laser capture microdissection)：這種方法是利用特殊的顯微鏡利用雷射將組織內的單細胞或是一小群細胞切割下來，這種方法的優點是能避免間質細胞或是免疫發炎細胞的污染，非常適合用來研究細胞位置功能性的研究，但缺點是儀器設備昂貴，而且容易因為切割不仔細造成細胞間的污染，另外，也因為雷射的緣故操作不慎也非常容易造成細胞的損傷而導致下游實驗的數據產出不完整。
- 流式細胞儀分離法：這種方法是利用分選型流式細胞儀對鞘液施加超高速的震動和電壓使其形成一顆顆的帶電的液滴，這些包裹著單細胞(single cell)的帶電液滴通過儀器中的電場後產生偏移然後進入收集器裡面。這種方式的優點是可以一次進行大規模的單細胞分選，而且精確度和一次能做的通量較大，缺點則是，這種方式是透過超高速震動與電壓的原理進行，因此有可能會影響到細胞正常的活性，且因為這種方式對input樣品量求較大，所以對一些不容易取的的樣品或是臨床樣品來說就無法用這種方式進行單細胞分離(single cell isolation)。
- 微孔晶片單細胞分離法：這種方式是透過讓一群細胞通過孔徑比細胞略大的微孔陣列，然後透過重力、物理方式或是電場讓通過的細胞以單顆的形式收集到微孔中的單細胞分離技術(single cell isolation)。這種方式的優點是成本低廉且操作方式簡便，缺點則是收集後的單細胞數量未必能進行後續的基因體定序分析，或是必須要使用大量的微孔晶片進行多次分離收集到的單細胞數量才足以進行後續的基因體定序分析，不過對於研究單細胞功能性或是其他不需要進行基因體定序的科學家來說這是一個非常簡便且成本低廉的單細胞分離技術(single cell isolation)。圖爾思獨家販售的 "iBioChips SMART ALIQUOTOR" 就是屬於這種方式。
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