技術分享-單抗好？多抗好？抗體選擇指南

抗體(antibody)在生物技術實驗中扮演非常重要的角色，舉凡：Western Blot(WB), Immunohistochemisty(IHC), Immunoprecipitation(IP), Immunofluorescence staining(IF), FLOW, CO-IP...等都需要抗體(antibody)的參與。因此抗體(antibody)的品質決定了實驗的數據是否可信與實驗的成敗。在2016年的 "Nature" 期刊也針對抗體的品質問題做出了報導，直接點出現今科研抗體市場的亂象，包含：抗體重複性問題、大量貼牌抗體、假抗體...等問題。因此，圖爾思在這邊就教大家幾個抗體選擇的方式與抗體好壞的判斷方式：
 

單株(monoclonal)抗體好？還是多株(polyclonal)抗體好？

這個問題其實並沒有一個正確的答案，首先我們可以從製程上做一個比較，多抗(polyclonal)抗體的製備簡單來說先針對要辨認的目標蛋白質(protein)設計抗原(蛋白質或是peptide)後注入動物體中利用動物體的免疫反應產生抗體(antibody)，然後抽取動物的血清經過一連串純化的過程製造而成，因此多抗可以辨識蛋白質上多個位點(epitope) ; 單株(monoclonal)抗體則是由融合瘤(hybridoma)所產出，也就是說單抗是由同一種免疫細胞所產出，因此單抗只會辨識蛋白質上一個位點(epitope)。所以從製備過程中單抗和多抗的優缺點也就非常清楚了。   
 

多株(polyclonal)抗體的優缺點：

1. 因為多抗辨識的是一個目標蛋白質上多個位點，因此非常適合用來進行蛋白質表達量非常少的WB實驗，而因為這個特性，通常進行IP或是ChIP時我們也強烈建議選擇多抗來進行。
2. 多抗相較單抗對於目標蛋白質變化的容忍度較大
3. 多抗可以辨識同源性的蛋白質，因此若您對於目標蛋白質的性質還不清楚時，建議使用單抗進行實驗
4. 多抗非常適合用來進行蛋白質修飾的研究
5. 因為製程的關係多抗在每個lot之間較容易產生誤差
6. 背景較單抗容易產生非專一性的訊號
7. 多抗較不適合用來進行單一位置修飾蛋白質差異研究
8. 多抗的應用性比單抗廣

 

單株(monoclonal)抗體的優缺點：

1. 每個lot之間單抗的差異性非常小
2. 單抗的專一性較高
3. 單抗較不易產生非專一性訊號
4. 單抗的重複性較多抗稍好

 

製備抗體用重組蛋白質還是peptide作為免疫抗原好？

重組蛋白質通常帶有多個抗體epitope，因此產生的抗體非常適合用來檢測自然結構蛋白質(native protein)或是變性結構蛋白質(denature protein)。另外，通常使用重組蛋白質作為抗原能讓動物體產生較強的免疫反應，因此得到的抗體效能比較強。

如何選擇好的抗體公司？

根據圖爾思多年的經驗，我們購買實驗室抗體前會先判斷這間抗體公司的抗體來源是自行生產的或是貼牌抗體，在能選擇的前提下我們更傾向購買前者公司的抗體，因為，抗體生產過程的透明度與抗體品質通常較好。另外，相信根據文獻選擇抗體是一般人常見的選擇方式，但根據上面的描述我們現在都應該了解選擇抗體應該是要按照實驗的需求與實驗的方法來選擇適合的抗體，如此一來，不但成功機會較高得到的數據也較為可信。最後，就是抗體公司的售後服務品質了，能提供好的售後服務的抗體公司一定更能加分。

 
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