如何提升轉染(transfection)效率

細胞轉染實驗(transfection)是現今生命科學研究最常用的生物技術之一，細胞轉染(transfection)是指將外源基因送入細胞內的技術，在基因功能研究領域、基因調控研究領域、基因突變分析、遺傳學研究與表達蛋白質等...扮演非常關鍵的角色。細胞轉染(transfection)的效率基本上決定了這些研究是否能進行下去或是能否順利執行，轉染技術(transfection)的方式非常多種(轉染技術介紹請點我)，目前實驗室最常使用細胞轉染試劑(transfection reagent)來進行轉染。當然，試劑並不是萬能的，好的細胞轉染試劑(transfection reagent)也必須要配合好的實驗方法和條件才能將轉染效率提升到最高，圖爾思在這篇文章中替大家整理幾個進行細胞轉染實驗必須要注意的幾個事項：
 

• 細胞培養基的血清中是否含有會影響轉染效率的物質：血清中通常含有多種會影響轉染試劑(transfection reagent)效率的物質，因此在進行轉染實驗的過程中最好不要使用含有血清的培養基，建議可以先改用opti-MEM來取代含有血清的培養基，等到轉染過程結束後在換回適合該細胞生長的培養基。若細胞對於無血清培養基較為敏感，則進行實驗室必須要先進行轉染試劑條件最佳化的預實驗。
• 抗生素的影響：一般而言若細胞培養基中含有penicillin和streptomycin，則這兩種抗生素會隨著轉染試劑進入細胞內，而導致細胞的活性或是機能受到改變，如此一來，細胞轉染(transfection)後的後續實驗會受到影響導致實驗數據不夠準確。
• 細胞代數的影響：我們建議使用第三代之後且不能太老的細胞來進行細胞轉染(transfection)實驗，因為通常第三代開始的細胞健康與細胞增生的狀況最佳，所以此時細胞對於轉染的接受度是最高的。
• 轉染前的細胞密度：這個要件幾乎是關鍵中的關鍵，貼附性的細胞在進行細胞轉染前千萬要把細胞密度調整到70%~90%，因為這樣的細胞密度可以確保細胞的生長狀況最佳，因此可以得到最多量的轉染細胞數量。懸浮性的細胞則建議調整至 2*10^6~4*10^6 /ml 最佳。
• 外源基因的品質：這個因素也幾乎是關鍵中的關鍵、重點中的重點，因此要拿來進行做細胞轉染實驗的外源基因必須要非常非常的純，若外源基因溶液中參雜鹽類、蛋白質或是過多雜質都會大大的影響外源基因和轉染試劑(transfection reagent)形成複合體，可想而知當然會影響轉染效率囉。

以上，為提高細胞轉染效率的幾個重點。

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