如何確保EVs(Extracellular Vesicles) 的穩定性？聽聽日本怎麼說

　　衛生福利部自2018年發布特管辦法，開放自體免疫細胞等細胞治療技術可於國內核准之醫療機構施行，再生醫療儼然成為多項不治之症的綠洲甘泉，除此之外，由細胞釋放的胞外體 (extracellular vesicles, EVs) 更是學者與醫者熱切鑽研的首要之重。

　　外泌體 (Exosome) 是一種帶有脂質雙層結構的小胞，從各種細胞中分泌出來，存在於血液、唾液、尿液、腦脊液等體液和細胞培養液中。是細胞外小胞 (EVs) 的一種。日本醫藥品醫療機器綜合機構 (Pharmaceuticals and Medical Devices Agency, PMDA) 於2023年1月發表了報告書「關於利用含有胞外體 (EV) 的治療製劑的報告書[1]」，報告書是在科學委員會設立的專家小組，於2021年8月至2022年9月期間，基於EV研究的治療用製劑的品質、安全性等考慮事項進行討論和審查。經過科學委員會於2022年12月的確認後彙整成報告書。

　　胞外體 (EVs) 包括外泌體 (exosome) 在內，被認為通過其包含的生理活性物質進行細胞間信息傳遞。根據報告，部分間質幹細胞 (MSC) 的旁分泌作用來自EVs，因此骨髓、脂肪和臍帶來源的MSC的EVs作為不使用細胞的下一代治療工具引起了關注，並且其應用被期待著。國內也在推動相關臨床應用的開發。

　　在報告書中提到，EVs製劑的品質保證需要適當的細胞分離或細胞株的建立以及其管理，並確保生產培養期間維持各種特性在適當範圍內。正如表一所示，EVs製劑的製造涉及到使用人類自體來源細胞、間質幹細胞等人源細胞、iPS細胞/ES細胞來源細胞、以及株化細胞。在這些細胞中，除了使用自體來源細胞外，根據ICH Q5D guideline (25) 等相關指南，建立細胞庫並對其進行合適性評估後方可用於生產。

為了建立一個穩定且具數據完整性的細胞庫，圖爾思生物科技提供了Cytiva的免液態氮程序降溫儀，可以提供穩定的降溫平臺，數據紀錄亦符合21 CFR part 11，可為您的EVs製劑建立最穩定的細胞庫。

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●品質穩定：透過熱傳導方式均勻降溫，維持所有檢體的降溫效果一致。

●避免汙染：無需使用液態氮，免除液態氮汙染風險。
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　　今年，由財團法人醫藥品查驗中心發表的指導原則草案[2]也提到，關於EVs製劑的起始原物料，為維持製造品質之一致性，建立細胞庫系統有其必要性。細胞庫之建立及管控，以及其安定性試驗部分，請參考我國之「人類細胞治療製劑臨床試驗申請作業及審查基準」，及 ICH Q5A、ICH Q5D 之相關說明。

　　也由於細胞庫是通過冷凍保存的，因此需要定期進行穩定性確認。在保存穩定性試驗中，評估的項目應當與進行細胞庫建立時進行的特性分析試驗相符，同時符合安全性、再現性及數據完整性。

[1] エクソソームを含む細胞外小胞（EV）を利用した治療用製剤に関する報告書

[2] 細胞外囊泡製劑製造與管制之研發策略指導原則第二版 (草案)