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2023.03
MISEV 2018懶人包:EVs的模樣
▋外泌體領域的新手、老手都必看圖爾思準備的MISEV 2018懶人包
“細胞外囊泡及其功能定義的最低實驗要求” (Minimal information for studies of extracellular vesicles) 是國際細胞外囊泡協會 (ISEV) 的共識倡議。 MISEV 的最後一次更新是 MISEV2018,得到了 400 多名科學家的意見,並在 EV 命名法、樣品收集和預處理、EV 分離和濃縮、表徵、功能研究和報告要求等六個廣泛主題中提出了建議/例外。為了收集對 MISEV 的意見和新更新的想法,ISEV 董事會對以前的 MISEV 作者和學會成員進行了調查。
MISEV 2018懶人包:EVs的模樣
通過多種技術互補判斷EV表徵 (characterization) ,才能評估分離方法學和確定生物標誌物的可能性。 Hendrix et al.的研究團隊強調了表徵數據的重要性,其發表說明:有五年時間內發表的EV相關文章中,只有約一半提出EVs的陽性標誌物 (positive marker) 。 MISEV 2014即定義研究者需要有三個陽性蛋白標誌物,且其中至少包括一個跨膜/脂質結合蛋白或膜蛋白,證實EV結構的存在;另還需要至少一個陰性標誌物來補充、追踪被共分離的非EV成分。
圖爾思攜手抗體專家Abclonal,提供完整的EVs抗體產品選擇,如經典的Tetraspanins( 四跨膜蛋白:CD63、CD8、CD81、CD82,膜內蛋白:Calnexin、TSG101;更多品項請參見下表
純度控制
MISEV 2018懶人包:EVs的模樣
通過多種技術互補判斷EV表徵 (characterization) ,才能評估分離方法學和確定生物標誌物的可能性。 Hendrix et al.的研究團隊強調了表徵數據的重要性,其發表說明:有五年時間內發表的EV相關文章中,只有約一半提出EVs的陽性標誌物 (positive marker) 。 MISEV 2014即定義研究者需要有三個陽性蛋白標誌物,且其中至少包括一個跨膜/脂質結合蛋白或膜蛋白,證實EV結構的存在;另還需要至少一個陰性標誌物來補充、追踪被共分離的非EV成分。
圖爾思攜手抗體專家Abclonal,提供完整的EVs抗體產品選擇,如經典的Tetraspanins( 四跨膜蛋白:CD63、CD8、CD81、CD82,膜內蛋白:Calnexin、TSG101;更多品項請參見下表
純度控制
2022年底,圖爾思更導入奈米流式分析儀 Nano Flow cytometry,可同步分析EVs的大小、濃度、並搭配免疫螢光染色分析EVs標誌物。我們的服務採用NanoFCM Flow Nano Analyzer,此系統已被多個知名的國家級研發單位與醫藥業龍頭所採用,如:美國國家衛生局 (National institutes of Health)、Lonza、MD Anderson Cancer center、evotec等。最齊全的外泌體研究工具都在圖爾思,更多詳情;而MISEV 2018對EV樣本新增了嚴格的規章,要密切注意下一篇懶人包!